退火的温度与什么有关(退火温度与什么因素有关)

2023-09-02 生活百科 By:admin

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退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素。引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。

 

相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起扩增效率下降,甚至无扩增产物出现。引物的退火温度可以通过Tm=4(G+C)+2(A+T)公式组略估算,一般在算出的Tm值上减去5摄氏度极为较合适反应设计退火温度。

本文到此结束,希望对大家有所帮助。

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